好一点小编带来了请教一下国内外有哪些生产流式细胞仪的公司以及详细信息,希望能对大家有所帮助,一起来看看吧!
流式细胞技术作为一个科学研究的一个手段,在国内的业务增长已经进入到稳步上升阶段。分析仪方面个人化小型分析仪的市场刚近两年刚被点燃,前期是AccuriC6铺路,CytoFlex以高性价比特征入场后收割果实,Millipore以Guava和Acea以Novocyte分食剩余市场。目前这个细分市场仍能保持年增长率30%以上,因此吸引了更多厂家进场,如美国的Cytek,其主营业务原本是为美国市场的存量BD用户提高供性价比的改装升级服务,高层以华人为主,发现了中国市场的巨大潜力,所以在2015年开始涉水中国市场,推出CytoFlex的对标产品Athena,也是主打性价比和小型易用。
分选仪方面,近几年分选仪开始放下身段,从原先普通用户难以企及的高价位使用复杂的形象逐渐分化出个人化易用型流式分选仪。BD公司作为目前流式市场的最大供应商,最先主动拓展个人化小型分选仪的细分市场,这个市场要求产品必须方便易操作、上手门槛低、人人都能轻松使用。目前这个细分在欧美已经成熟,主要用户是Biotech和Biopharma类公司,以及对流式分选使用较多的Inpiduallab;但在国内情况不同,一来公司数量少且大都还在早期成长阶段,产品和药物开发还没发展到对流式大量需求,二来是funding问题,有足够经费自己购*一台分选仪的inpiduallab是少之又少。所以这部分市场需求在国内与corefacility相比几乎可以忽略。但BD公司在国内基本上复制在欧美的策略。其最早推出的产品是FACSJazz,声称其是一款个人型易操作的流式分选仪,但Jazz是基于Influx简配而来,无奈受限于原理和设计,操作依然非常繁琐,普通使用者面对这样的仪器还是无所适从,因而Jazz名不副实,是一次失败的试水,从2011年推出到2015年黯然停产退市。Biorad有款分选仪产品S3也是针对这个细分,价格做到100万人民币以下,在分选仪市场算是比较亲民了,只不过完成度欠佳及国内渠道缺乏的原因,使得它在国内没有真正被推广开。
一、如何搭配流式抗体荧光标记
流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多
A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体
1) BD流式细胞仪(06版目录第614页)
流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:
流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/三个颜色,而选配的Calibur (FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光,可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。
不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的,比如Calibur的FL3(第3通道)能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCPCy5.5,PE-Cy7,而Aria的第3通道只能检测PE-TexasRed, PE-Cy5, PerCP。Calibur第3通道能检测的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道检测。Calibur和LSR都能检测4个颜色,但是第4个通道检测荧光素是不一样的
搭配荧光素原则
搭配流式荧光素有2个原则:每个通道只能选择1种荧光素;各个通道之间的荧光素可以随意搭配,但需注意
1、每个通道只能选择1种荧光素。以Calibur为例说明,Calibur的FL1通道选择了FITC就不能选择AlexaFluro488,或者选择了Alexa Fluro488就不能选FITC Calibur的FL3通道尽管能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7五个荧光素,但是我们我们搭配的时候只能选择其中1个。
2、各个通道之间的荧光素可以随意搭配:如果客户的流式细胞仪能做4个通道,在第1个原则之下,那么每个通道随便选出1个荧光素就可以组合成4个颜色。以2跟激光的Calibur为例,Calibur各个荧光素之间可以搭配出16种组合。
比如常用的搭配是F I T C( F L 1 )+P E(F L 2)+PerCP(FL3)+APC(FL4), 这个搭配组合可以更改成Alex Fluro(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+APC(FL4), 或者FITC(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+Alex Fluro(FL4),或者FITC(FL1)+PE(FL2)+PE-Cy5(FL3)+APC(FL4)等等。总之,在第1原则之下,我们可以随意搭配和组合各个荧光素。但是需要注意的是,APC和PE-Cy5一起使用。
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